Oinarrizko sarrera
Eritrozitoen lisatua globulu gorriak kentzeko metodo erraz eta errazenetako bat da, hau da, globulu gorriak lisatuarekin zatitzea, zelula nukleatuei kalte egiten ez diena eta globulu gorriak guztiz ken ditzake. Lisatearen mozketa odol gorriak kentzeko metodo arina da, batez ere entzimaren digestioaren bidez sakabanatutako ehun-zelulak bereizteko eta arazteko erabiltzen dena, linfozitoak bereizteko eta arazteko eta ehunen proteina eta nukleoen esperimentuetan globulu gorriak kentzeko. azido erauzketa. Globulu gorrien lisatuaren bidez lortutako ehun-zelulek ez dute globulu gorririk, eta lehen mailako hazkuntzarako, zelulen fusiorako, fluxu-zitometrirako, azido nukleikoen eta proteina bereizteko eta ateratzeko, etab.
Erabiltzeko jarraibideak
Ehun-zelulen lagina
1. Ehun freskoak pankrea/entzimak edo kolagenasak digeritu eta zelula bakarreko esekiduran barreiatu ziren, eta gainditzailea zentrifugazio bidez baztertu zen.
2. Hartu ELS lysate hozkailutik 4â-tan, gehitu ELS lysate zelula hauspeatuari 1:3-5 proportzioan (gehitu 3-5ml lysate 1ml zelula trinkotuta), astiro-astiro putz egin eta nahastu.
3. Zentrifugatu 800-1000 rpm-tan 5-8 minutuz eta bota goiko likido gorri garbia.
4. Hauspeatutako zatia Hank-en disoluzioarekin edo suerorik gabeko kultura-soluzioarekin zentrifugatu zen 2-3 aldiz.
5, pitzadura osoa/osoa ez bada 2 eta 3 urratsak errepika daitezke.
6. Berregiteko zelulak ondorengo esperimentuetarako; RNA ateratzen bada, hobe da DEPC ura erabiliz 4. urratsetik prestatutako disoluzioan egitea
Globulu gorriek bizi-ziklo oso laburra dute, 120 egunekoa bakarrik, baina odola oso azkar ugaltzen dute, eta kasu honetan bereziki zelula zatitzeko gai dira, eta denetan zatitzen diren zelula azkarrenak dira, beraz, zelula hau oso baliotsua da, beraz, oso erabilgarria da zelula-kulturarako. Oso erraza da, ez dauka inongo organulurik, zelulen mintzak eta proteinak besterik ez.